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艾本德(Eppendorf)Research plus 系列移液器是精密儀器,定期校準對保證移液準確性至關重要。其校準分為兩個主要部分:機械校準和性能驗證。
一、艾本德Research plus八道移液器重要提示
1、建議:對于高精度要求或認證實驗室(如ISO/GMP),建議將移液器送至艾本德服務中心或由經過培訓的專業人員進行校準。
2、自行操作:如果您具備經驗并擁有必要設備,可進行日常的“用戶校準"或“現場核查"。以下步驟基于手冊和通用標準。
3、工具準備:分析天平(精度需達0.01mg,用于小體積)、稱量皿、去離子水、溫度計、濕度計、無絨布。
二、艾本德Research plus八道移液器詳細步驟分解
1、準備工作
(1)環境穩定:在無風、無震動的穩定臺面上進行。記錄室溫和濕度(理想條件:20-25°C,50-70%相對濕度)。
(2)清潔移液器:用蘸有70%乙醇的無絨布擦拭移液器外表面,特別是吸頭圓錐部分。確保活塞運動順暢。
(3)準備測試液體:使用高純度去離子水。記錄水溫,通過《水密度表》查找該溫度下水的密度(Z因子)。
(4)預潤濕吸頭:使用原裝或高質量吸頭。在正式測試前,對同一體積的液體進行3-5次抽吸排放操作,使吸頭內壁形成穩定的氣溶膠環境。
(5)天平準備:將稱量皿放在天平上,穩定后去皮歸零。
2、性能測試(四點測試法)
這是驗證移液器精密度和準確度的關鍵。
(1)選擇測試點:通常選取移液器量程的最小體積、中間體積、MAX體積,以及一個常用工作體積。
(2)測試方法(以100μL為例):
將移液器設定至目標體積(如100μL)。
安裝新吸頭,吸取去離子水。
將液體垂直、緩慢地排入稱量皿底部,等待約1秒后,吸頭頂部輕觸液面以移去掛滴。
記錄天平顯示的質量值(mg)。去皮歸零,準備下一次稱量。
(3)重復此操作10次,記錄10個質量讀數。
3、數據處理:
(1)計算平均值:Avg = (M1+M2+…+M10)/10
(2)計算實際體積:V_actual (μL) = Avg (mg) / Z_factor (mg/μL)
(3)計算準確度(系統差):Inaccuracy % = [(V_actual - V_set) / V_set] × 100%
(4)計算精密度(隨機差):Imprecision % = [標準偏差SD / V_actual] × 100%
4、結果判定:對照艾本德Research plus的技術規格(通常為 ±0.1-0.7% 準確度差,≤0.07-0.2% 精密度差,取決于體積)。常用寬松標準是差在±1%以內為優秀,±2%以內為可接受。 如果超出范圍,則需進行機械調整。
三、機械調整
如果測試不合格,則需調節內部校準旋鈕。
1、確認型號:確保您的Research plus移液器具有可調校準功能(查看說明書或觀察底部是否有小窗蓋)。
2、打開調節窗:找到移液器手柄底部的圓形小窗蓋。使用專用工具(通常隨移液器附帶)或小號一字螺絲刀,逆時針旋轉并取下窗蓋。
3、調節校準旋鈕:
(1)窗蓋內有一個六角形校準旋鈕。
(2)使用艾本德專用校準工具或合適尺寸的六角扳手進行微調。
(3)調節方向口訣:
“順大逆小" 或 “順加逆減"
如果實測體積 小于 設定體積(負偏差),需要增大出液量。將六角扳手順時針旋轉(通常1小格對應約0.2-0.5%的體積變化)。
如果實測體積 大于 設定體積(正偏差),需要減小出液量。將六角扳手逆時針旋轉。
(4)重要:每次只進行微小的調整(如1/8圈),然后蓋上窗蓋,重復第二步的性能測試。切勿一次性大幅度旋轉。
(5)鎖定并關閉:調整至合格后,確保旋鈕穩定,然后將窗蓋裝回并順時針擰緊。
(6)調整Volume Limit(如需要):Research plus頂部還有一個“Volume Limit"調節螺絲,用于設定MAX和最小體積的機械限位。非專業人員請勿輕易調整此螺絲,錯誤的調整可能導致活塞卡死或量程超限。通常只需調整底部的CALIBRATION旋鈕。
四、驗證與記錄
1、重復測試:在調整后,必須重新進行完整的四點測試(至少包括最小、MAX和常用體積),確保所有測試點均在允許差范圍內。
2、標簽與記錄:
在校準合格的移液器上粘貼狀態標簽,注明校準日期、下次校準日期、操作人。
詳細填寫校準記錄表,包括:儀器編號、測試體積、設定值、實測值、差%、環境溫濕度、結論等。
3、清潔收納:將移液器調至MAX量程,清潔后妥善存放。