這是一份詳細、結構化且面向用戶操作的 伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統技術參數與使用說明手冊。

一、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統概述

Gene Pulser Xcell 是一款全功能、模塊化的實驗室電穿孔儀，適用于細菌、酵母、哺乳動物細胞及其他真核細胞的轉化/轉染。其核心特點是 指數衰減波 電擊，通過精確控制電壓、電容和電阻參數，在細胞膜上形成可逆的瞬時孔隙，使外源DNA、RNA或其他分子高效進入細胞。

二、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統組件

1、主機: 包含控制界面、電容模塊和高壓電源。

2、電擊槽: 可容納1-4mm間隙的電擊杯。

3、專用電擊杯: 一次性或可重復使用（需清潔消毒），規格通常為1mm（哺乳動物細胞）、2mm（通用）、4mm（細菌）。

4、PC連接軟件（可選）: 用于遠程控制和數據管理。

三、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統核心技術參數

類型：電轉化儀

尺寸（長x寬x高）：31x30x14 cm

重量：6.6 kg

電源：240W（在短時間充電時）

輸出：電壓： 10–3,000 V

電容：10–500 V，25–3,275 µF，增量為 25 µF

樣品電阻：低 20 ?（10–2,500 V 時）低 600 ?（2,500–3,000 V 時）

測量范圍：從原代細胞和干細胞到細菌和酵

電阻（并聯）：50–1,000 ?，增量為 50?，正無窮大

連續工作時間：8小時

環境溫度：溫度 0–35℃，濕度 0–95%

產地：新加坡

四、伯樂Gene Pulser Xcell 電穿孔系統標準操作流程

A、實驗前準備

1、儀器準備: 連接電源，打開主機電源開關。儀器進行自檢。

2、參數預設: 根據待轉染細胞類型，參考附錄的推薦起始參數或已發表的文獻，在主機面板上設置預期的 電壓 (V)、電容 (C) 和電阻 (R)。

3、樣品與電擊杯準備:

將待轉染細胞與DNA/分子混合于適當的緩沖液中（如PBS、電轉專用緩沖液）。保持樣品和電擊杯低溫（冰上） 以增加細胞存活率。

將混合液轉移至對應間隙的電擊杯（例如，哺乳動物細胞常用1mm杯），確保液體覆蓋電極底部，且無氣泡。

擦干電擊杯外壁，將其穩妥放入電擊槽。

B、電擊過程

1、安全警告: 確保電擊槽蓋緊閉（安全聯鎖裝置），儀器顯示“READY"。

2、執行電擊: 同時按下電擊槽兩側的 “Pulse" 按鈕（雙手操作安全設計），直至聽到蜂鳴聲并看到電擊完成提示。

3、記錄結果: 屏幕將顯示 實際輸出電壓 和關鍵的 時間常數 (τ)。記錄這些數據對優化實驗至關重要。

C、電擊后處理

1、立即取出電擊杯，向杯中加入適量的恢復培養基或緩沖液，溫和吹打混勻后，將細胞轉移至培養容器中。

2、根據細胞類型，進行后續培養（如，在37°C， 5% CO?培養箱中恢復培養）。

五、全注意事項

1、高壓危險！ 儀器內部和電擊杯中存在致命高壓。切勿在儀器通電或電擊后立即打開電擊槽蓋或觸摸電擊杯內部電極。等待至少10秒，或確認屏幕無高壓提示。

2、生物危害: 電擊杯和樣品可能含有生物危害物質。處理時需佩戴手套，并按生物安全規程處置廢棄物。

3、電弧預防: 確保電擊杯外壁干燥，電極清潔無腐蝕，樣品量足夠且無氣泡，以防止產生電弧損壞儀器和樣品。

4、專用電擊杯: 僅使用伯樂原廠或認證兼容的電擊杯，不兼容的杯子可能導致參數不準或產生電弧。