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伯樂ChemiDoc凝膠成像系統技術參數及使用說明書 的擬寫版本。它綜合了ChemiDoc系列(如MP、XRS+、Touch等)的通用核心功能,旨在提供一份實用的操作參考。重要提示: 本說明書為通用指南。具體操作請以您實驗室所配置的具體型號(如ChemiDoc MP, XRS+, Touch)的用戶手冊為準。
一、伯樂ChemiDoc凝膠成像系統概述
ChemiDoc是一款集化學發光、熒光、比色法(染色凝膠)和可見光成像于一體的多功能模塊化成像系統。它采用高靈敏度科學級CCD相機和智能光源系統,可替代傳統的暗室膠片曝光,實現核酸凝膠、蛋白凝膠、印跡膜等的快速、精準、定量數字化成像。
二、伯樂ChemiDoc凝膠成像系統核心參數
型號:ChemiDoc
貨號:12003153
尺寸(長x寬x高):61x51x53 cm
重量:38 kg
成像面積:21 x 16.8 cm
檢測器:610萬像素制冷CCD
熒光檢測:否
類型:化學發光凝膠成像
電壓:100–250 V
頻率:50-60hz
溫度范圍:10–28°C
動態范圍:>4 O.D
產地:美國
三、伯樂ChemiDoc凝膠成像系統核心軟件參數
1、成像控制:全自動控制曝光時間、光圈、焦距、光源和濾光片。
2、圖像采集模式:全自動(一鍵優化)、手動、時間序列(用于動力學監測)、多重熒光/化學發光疊加。
3、分析功能:分子量測定、泳道/條帶定量分析、信噪比計算、歸一化處理、積分密度分析、菌落計數等。
4、輸出格式:圖像可保存為多種格式(如*.scn, TIFF, JPEG, PNG),數據可導出至Excel。
四、伯樂ChemiDoc凝膠成像系統操作流程
1、開機與準備
(1)打開系統主機電源和電腦。
(2)啟動 Image Lab™ 軟件。軟件將自動初始化并與相機連接。
(3)抬起樣品艙門,將您的凝膠或膜放置在樣品臺中部。確保樣品表面平整,無氣泡。
2、選擇成像方法(核心步驟)
在軟件主界面或“Protocol"選項卡中,根據您的樣品選擇對應的預制或自定義成像方法:
(1)化學發光:用于ECL、ECL Plus等化學發光底物。
(2)熒光:選擇與您的染料匹配的通道(如“Cy2", “Cy3", “Cy5")。
(3)考馬斯膠/染色凝膠:選擇“Coomassie Blue"或“Stained Gel"模式。
(4)SYBR Safe/EtBr膠:選擇“SYBR Safe"或“EtBr"模式(使用透射白光或紫外光)。
(5)比色法:用于TMB/NBT/BCIP等沉淀顯色。
3、圖像采集
(1)自動成像(推薦新手):點擊軟件界面上的“自動曝光" 按鈕。系統將智能選擇曝光時間、對焦和光源,并捕獲圖像。
(2)手動成像:
在“成像"面板中,手動選擇光源、濾光片、光圈和曝光時間。
點擊“實時取景"進行預覽。
調整參數直至圖像滿意,點擊“捕獲"獲得最終圖像。
4、圖像分析與保存
(1)捕獲的圖像將出現在軟件窗口中。
(2)使用工具欄中的“泳道和條帶分析" 工具進行定量:
自動或手動定義泳道。
自動或手動檢測條帶。
查看并導出分子量、濃度/強度表格。
(3)通過 “文件" > “另存為" 保存圖像和數據。強烈建議保存為原始的*.scn格式以保留所有數據和后續編輯能力,同時可另存為TIFF用于發表。
5、關機
(1)關閉Image Lab™軟件。
(2)關閉電腦和系統主機電源。
(3)清潔樣品臺。
五、針對不同應用的實踐指南
1、化學發光檢測:
(1)使用超靈敏模式。
(2)進行多幀不同時長曝光(如1s, 10s, 60s),選擇信噪未飽和的圖像。
(3)確保膜被底物覆蓋,無干涸。
2、多重熒光檢測:
(1)嚴格按熒光染料光譜分離順序成像,通常從最長波長(如Cy5)開始,到最短波長(如FITC)結束,以避免通道串色。
(2)使用軟件中的“疊加"功能合并不同通道圖像。
3、染色凝膠(考馬斯、銀染):
(1)選擇透射白光。
(2)確保凝膠背景均勻。可通過調節曝光時間和光圈(增加光圈值如f/8可減少進光,改善過飽和)來優化對比度。
4、核酸凝膠(EB/SYBR Safe):
(1)使用紫外光源時,務必在放下艙門后再開啟紫外燈,避免紫外線傷害眼睛和皮膚。
(2)使用紫外透射或藍光透射(對SYBR Safe更安全且敏感)。
六、日常維護與故障排查
1、維護:
(1)每日:用無塵布和溫和清潔劑擦拭樣品臺玻璃。
(2)定期:檢查并清潔透射白光板和反射光源窗口。避免用手直接觸摸光學元件。
2、常見問題:
(1)圖像模糊:檢查對焦(啟用自動對焦),確保樣品平整。
(2)信號弱:確認選擇了正確的光源和濾光片;增加曝光時間;檢查樣品制備是否有效。
(3)背景過高:減少曝光時間;選擇更小的光圈值;確保樣品臺和樣品背景干凈。
(4)軟件無法連接相機:檢查所有USB/電源連接,重啟電腦和主機。
總結:
伯樂ChemiDoc系統通過其模塊化光源和智能化的Image Lab軟件,將復雜的成像流程簡化為“選擇方法-點擊拍攝-自動分析"三步。熟練掌握不同檢測模式的選擇和基本的手動參數調整,是獲得高質量、可發表圖像和數據的關鍵。